甘薯脱毒生产技术

1.材料选择和消毒

选择适宜当地栽培的高产、优质或特殊用途的生长健壮甘薯品种植株作为母株，取枝条，剪去叶片后切成带1个腋芽或顶芽的若干个小段。

剪好的茎段用流水冲洗数分钟后，用70%酒精处理30 s，再用0.1%升汞消毒10 min，无菌水冲洗5次，或用2%次氯酸钠溶液消毒5 min，无菌水冲洗3次。

2.茎尖剥离和培养

把消毒好的芽放在解剖镜下，用解剖刀剥去顶芽或腋芽上较大的幼叶，切取0.3～0.5 mm含有1～2个叶原基的茎尖分生组织，接种在培养基上。

甘薯茎尖培养较理想的培养基为 MS+0.1～0.2 mg/L IAA+0.1～0.2 mg/L 6‑BA+3%蔗糖，若补加0.05 mg/L GA₃，对茎尖生长和成苗有促进作用。培养基pH值为5.8～6.0。培养条件以温度25～28℃，光照1500～2000 lx每天14 h为宜。

不同品种的茎尖生长情况有差异。一般培养10 d茎尖膨大并转绿，培养20 d左右茎尖形成2～3 mm的小芽点，且在基部逐渐形成黄绿色愈伤组织。此时应将培养物转入无激素的MS培养基上，以阻止愈伤组织的继续生长，使小芽生长和生根。芽点基部少量的愈伤组织对茎尖生长成苗有促进作用，但愈伤组织的过度生长对成苗则非常不利且有明显的抑制作用。

3.茎尖苗的初级快繁

当试管苗长至3～6 cm时，将小植株切段进行短枝扦插，除顶芽一般带1～2片展开叶外，其余全部切成一节一叶的短枝。切下的短枝立即转接于三角瓶内无激素的MS培养基中，条件同茎尖培养。2～3 d后，切段基部即产生不定根，30 d左右长成具有6～8片展开叶的试管苗。

待初级快繁到一定数量后，将同一株号的试管苗分成3部分：一部分保存；另一部分直接用于病毒鉴定；再一部分移入防虫网室内的无菌基质中培养。茎尖培养产生的试管苗，经严格病毒检测后，才能确认为脱毒苗。

4.种薯的繁育

脱毒试管苗可继续在试管内切段快繁，也可在防虫条件下于无菌基质中栽培繁殖。在防虫温室或网室的无病毒土壤上栽种脱毒苗，使其结薯，即为原原种薯，育出的薯苗为原原种苗。原原种比试管苗更便于分发运送，以供应生产原种。

原种生产也应在防虫条件下的无病毒土壤上进行，以原原种(苗)为种植材料，必要时可进行以苗繁苗的方法，而取得较多的原原种。原原种苗培育的种薯即为原种。

种薯可分为不同的等级。一级种薯的生产要求，在隔离地块上栽培原种，地块四周500 m以上范围内不栽种同种植物，注意及时防病治虫。二三级脱毒种薯生产地块的条件可适当降低，种薯每种一年降一级。脱毒种薯、种苗用于生产，增产效果一般可维持2～3年。其后就应更换新的脱毒种、种苗。